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脱色摇床,做western blot要发SCI

来源:整理 时间:2023-06-09 00:59:02 编辑:挖葱教案 手机版

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1,做western blot要发SCI

能不能发SCI和你的仪器试剂厂家没有要求,但是对你做出的blot的质量有要求。能用一般的仪器试剂做出prefect的图来,那说明你的本领高。

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2,脱色摇床 英文怎么说谢谢帮忙

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3,western blot 成像的仪器英文名字叫什么

western blot实验都需要的基础仪器有:电泳仪,制胶板,电泳槽,湿转的转膜槽或者半干转仪,脱色摇床,暗室,X光片,红外灯,成像仪,一些基础耗材和试剂等基本上生化实验室要做western blot还是很容易的
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4,仪器脱色摇床的原理和应用

应用:电泳凝胶分离谱带的固定,考马斯蓝染色和脱色时的振荡晃动,硝酸银染色时的固定,染色,显影等,放射自显影实验中X光底片的显影、定影,电泳转移后纤维素膜的进一步处理,抗原—抗体的反应和染色,分子杂交,细胞培养等.凡样品需要在溶液中晃动的实验均可选用该仪器。 原理:详细的原理我也不清楚,可能就是单纯的摇晃震动吧!
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5,中国国际妇幼婴童产业展览会暨轻工精品展览会简称什么会

不知道。。www.SHUNLIUYQ.INFO真空干燥箱 www.bilon17.net超声波细胞粉碎机www.bilon17.net细胞破碎仪www.bilon17.org光化学设备www.FDLYQ.INFO往复式脱色摇床www.XIANOUYQ.INFO台式恒温振荡器www.bilonequipment.info大容量振荡器www.bilonequip.info水浴恒温振荡器www.cnbilon.info真空泵www.experi17.info/恒温水浴锅www.chinaapparatus.info/高速万能粉碎机www.chinaequipmentcenter.info电动匀浆机

6,红糖白糖冰糖的主要成分都是蔗糖三者有区别吗

红糖是蔗糖和糖蜜的混和物,白糖是红糖经洗涤、离心、分蜜、脱光等几道工序制成的。冰糖则是白糖在一定条件下,通过重结晶后形成的。
不论是红糖、黄糖、白糖、冰糖,起初的提炼作法都是一样的,之所以会成为不同颜色、型态的糖,原因在于最后精制与脱色的程度不同。精制的程度越高颜色越白、纯度越高,但是甜度却不会因为纯度高而增加。 这几种糖中甜度较高的是红糖与黄糖。红糖的成分所含物质丰富,除了甜味外,还具有独树一格的特殊风味,适合运用在作法简单的料理上,才不会使味道太过复杂而弄巧成拙,例如用来制作红豆汤、红糖糕、红茶、咖啡甜味皆醇厚独到。黄糖的风味与甜味居于中间,因此最常用来烹调一般的菜肴。白糖与冰糖甜度较低,但因为甜味的纯度高,可用来调制饮料或制作西点不会影响其他材料的原味,且具有使糕点质地蓬松的效用。 红糖通常是指带蜜的甘蔗成品糖,一般是指甘蔗经榨汁,通过简易处理,经浓缩形成的带蜜糖。红糖按结晶颗粒不同,分为赤砂糖、红糖粉、碗糖等,因没有经过高度精练,它们几乎保留了蔗汁中的全部成分,除了具备糖的功能外,还含有维生素和微量元素,如铁、锌、锰、铬等,营养成分比白砂糖高很多。 白糖是由甘蔗和甜菜榨出的糖蜜制成的精糖,白糖色白,干净,甜度高。 而冰糖是以白砂糖为原料,经过再溶,清净,重结晶而制成。是冰块状水合蔗糖晶体。一般用白砂糖、水、蛋清等,经加热、过滤、浓缩结晶、干燥而成,质地坚硬透明。
蔗糖的品种因原料、加工工艺不同,有精制幼(小粒)砂糖、精制绵白糖,普通白砂糖、普通绵白糖,方糖和块糖,冰糖,红糖等。 精制幼砂糖 精制幼砂糖即精制小粒砂糖,因其纯净度高,蔗糖份含量达到99.8%以上,水分含量极少,各项卫生指标控制严格,晶粒小、均匀、松散,易溶化,易贮藏,不易受潮结块,特别适合于供作家庭常备食用糖。 精制绵白糖 精制绵白糖在颗粒小、易溶方面与精制幼砂糖相似,两者的主要区别是,绵白糖的晶粒更细小,一般不超过0.3毫米、且要求均匀;此外、在分蜜后,加入1.5~2.5%(按固形物计)的砂糖转化糖浆或精炼淀粉糖浆,保留0.8~1.6%的水分,在螺旋输送槽中边输送、边搅拌使其混合均匀;最后经绵白糖干燥机将水分、温度调控到规定的要求后装袋封口。由于绵白糖中含有一定量的转化糖浆(含果糖成分),味甜、吸湿,因而可保持糖的绵软状态和光泽。但是因绵白糖水分含量较高(相对砂糖而言),所以不宜长期贮藏;在干旱地区与季节,绵白糖容易脱水结块,不利于方便食用。绵白糖一旦脱水结块后,不宜采用机械方法破碎。届时、可将结块绵白糖置于一定温湿度条件下(例如放在碗中,置于蒸锅内,利用热水的蒸汽、不需用明火加热),勿需太长时间,绵白糖就会自行吸湿松散开来,之后、如将糖置于密闭罐中,防止水分散失,可保持松散状态. 原糖 又称粗糖,系以甘蔗为原料,经压榨取汁、糖汁清净处理,煮炼结晶,离心分蜜,制成的带有一层糖蜜,不供直接食用、作为精炼糖厂再加工用的原料糖;糖度(转光度)不低于97%。 普通白砂糖 系以甘蔗、甜菜或原糖(粗糖)为原料,经提取糖汁(或再溶),糖汁或糖浆清净处理、煮炼结晶,离心分蜜、筛选干燥等工序加工制成的成品蔗糖结晶,蔗糖分不低于99.5%。 普通绵白糖 系以甜菜或原糖(粗糖)为原料,经精炼加工生产的晶粒细小、颜色洁白、质地绵软的成品糖,总糖分(蔗糖分+还原糖分)不低于97.92%。 红糖 系带蜜的甘蔗成品糖,在我国,指甘蔗经榨汁和简易石灰法澄清处理后,经浓缩煮炼制成的带蜜糖。 根据加工工艺的不同,红糖又可分为赤砂糖(结晶颗粒较大),红糖粉(结晶粒子细小),片糖、砖糖(用模具)、碗糖(用模具)等;赤砂糖、红糖是用经过澄清处理的低纯度糖浆,在真空煮糖罐中煮制而成的覆盖一层棕红色、具有甘蔗风味糖浆的结晶糖,晶粒大的为赤砂糖,晶粒细小的叫红糖,其成分为:蔗糖分88~93 %,还原糖1.5~4.5%,水分2.5~3.5%;片糖的生产方法则是将达到一定过饱和度的热糖浆(约92bx)从煮糖器分配器中流入片糖连续成型带上,在均衡平稳的运送过程中,糖浆被扒平,自然冷却凝固,经机械划线、分离出带,分片成糖,降温包装,其成分为:蔗糖分83%以上,还原糖6.5%以下,水分5%以下;所有红糖,不论是结晶糖或成型糖,其共同的特征是:一、成品红糖中几乎保留了蔗汁中的全部成分;二、保留了甘蔗糖汁的原汁、原味,特别是甘蔗的清香味。消费者喜爱红糖、选择红糖,主要是基于红糖的这些基本特征。 由于甜菜糖糖蜜带有令人不愉快的气味,因此、世界各国均不生产带糖蜜的甜菜红糖。 由于进口原糖长途、长时间散装、散运,卫生条件无保障,无法保证清除掉原糖糖蜜中可能存在的有害物,因而也不能用于生产红糖。 方糖与块糖 将含水分2~2.5%精制小粒砂糖原料,通过一转鼓式方糖压块成型机压成方块状,然后将成型的方糖,置放到金属托盘上,于干燥箱中将水分烘干至0.5%以下,冷却至室温后用纸盒包装。 方糖因晶粒间有透气孔隙,因而具有定量、易溶,食用方便的特点,特别适合供作餐桌用糖。 如适当增加原料含水量,加大成型时的压缩比,烘干后,可得比较硬实的块糖,块糖携带、食用方便,为牧区和流动性大的工作人员所喜爱。 冰糖 冰糖的生产方法有两种,第一种生产方法是挂线结晶养大法,即将热的精炼饱和蔗糖溶液缓缓倒入挂有细棉线的桶中,在结晶室中经过7天以上缓慢冷却结晶,蔗糖结晶围绕棉线形成并养大成大粒、大块冰糖。第二种生产方法是投放晶种养大法,即在一摇床式结晶槽中,放入热的精炼饱和糖液,投入定量的晶种,在摆动槽中边摆动、边缓慢降温(用水套夹层保温、控温)使结晶养大,形成单晶冰糖。冰糖的理化性质与精炼砂糖相同,在中国被用作中药引子,在不少国家被当作医治伤风感冒的良药,更受到广大农村消费者的喜爱。 所有的蔗糖产品都必须符合中国“国家食糖卫生标准”。

7,western 的步骤

1)按厂商的使用指南用两块干净的玻璃,平板和0.75mm垫片组装电泳装置中的玻璃平板夹层,并固定在灌胶支架上。  2)按表7.1配制分离胶液体并脱气,然后加入10%的过硫酸铵和TEMED,轻轻搅拌混匀。  表7.1 聚丙烯酰胺分离胶的配制  试剂成分 配制不同浓度分离胶所需试剂(ml)  5% 8% 10% 12% 15%  Acry:Bis (30:0.8) 2.50 4.00 5.00 6.00 7.50  4×Tris·Cl/SDS, pH8.8 3.75 3.75 3.75 3.75 3.75  H2O 8.75 7.25 6.25 5.25 3.75  10%过硫酸铵 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05  TEMED 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01  按所需分离的蛋白质分子大小选择合适的丙烯酰胺百分比浓度,一般地,5%的凝胶可用于60~200kDa的SDS变性蛋白质分子的分离,10%用于16~70kDa,15%用于12~45kDa。  3)用一根巴斯德吸管立即将分离胶液体沿夹层中一条垫片的边缘加入于玻璃平板夹层中,至凝胶约5cm高为止。样品体积少于10μl不需灌制积层胶。  4)用另一根巴斯德吸管,先从一边的垫片,再从另一边垫片往夹层的液面顶部缓缓加入一层水饱和异丁醇(厚约1cm)。让凝胶在室温聚合30min。  聚合后,可见在顶层异丁醇与凝胶的界面间有一清晰的折光线,胶的聚合失败往往问题在于过硫酸按或TEMED,或两者都有。  5)倾去顶层的异丁醇,并以1×Tris-Cl/SDS, pH8.8缓冲液冲洗凝胶的顶部表面,尽量用吸水纸吸干。  6)按表7.2配制积层胶液体,用吸管将液体沿一条垫片加入到玻璃平板夹层,直至夹层的顶部。  表7.2 聚丙烯酰胺积层胶的配制  GEL%(3.9%) Total (10.05ml)  Acry:Bis(30:0.8) 1.30 ml  4×Tris·Cl/SDS, pH6.8 2.50 ml  H2O 6.10 ml  10%过硫酸铵 0.05 ml  TEMED 0.01 ml  7)将0.75mm厚的梳子插入夹层的积层胶液体中,必要时,再补加积层胶液体充盈剩余空间。让积层胶室温聚合30min。  8)在具螺口盖的微量离心管中,用2×SDS加样缓冲液按1:1(v/v)稀释待测蛋白质样品,于100℃煮沸5-10min。如样品是蛋白质沉淀物,加入50~100μl 1×SDS加样缓冲液溶解之,并同样在100℃煮沸5-10min。按供应商的使用指南用2×SDS加样缓冲液溶解蛋白质分子量标准混合物。  对于0.3cm宽的加样孔,推荐加样体积以不超过20μl 为宜。用考马斯亮蓝染色法显迹,成分很复杂的蛋白质混合物需加25~50μg,而样品中只有一种或不多的几种蛋白的话,只需1~10μg蛋白量。采用银染显迹时,样品用量可减小10~100倍(按样品的复杂程度在小于20μl的体积溶有0.01~0.5ng蛋白样品不等)。  2×SDS加样缓冲液(loading buffer)配制:  成 分 体积 (ml)  0.5M Tris·Cl (pH6.8) 12.5  20%SDS 11.5  Glycerin 10  2% Blue-Bromo-phenol 2.5  β-mercaptoethanol * 5.0  加H2O至总体积50 ml,分装  *β-mercaptoethanol 在临用前加入。  9)小心拔出梳子,避免撕裂聚丙烯酰胺凝胶加样孔。取出梳子后,以1×SDS电泳电泳缓冲液冲洗加祥孔,并以此缓冲液充满之。  10)按厂商指南将凝胶板固定到电泳装置的上缓冲液室(上槽),同时往下缓冲液室(下槽)加入推荐量的1×SDS电泳缓冲液。  11)将固定于上槽的凝胶板放入下槽中,并往上槽加入部分电泳缓冲液至刚好淹没凝胶的加样孔。  12)用带平嘴针头的50μl注射器将同样浓度的蛋白质样品等体积加入到样品孔中,小心加样使样品在孔的底部成一薄层,对照孔加入蛋白质分子量标准样品,如有空置的加样孔,须加等体积的空白1×SDS样品缓冲液,以防相邻泳道样品的扩散。  13)再往上槽加入余下的1×SDS电泳缓冲液。此操作缓慢小心,以防冲起样品孔中的样品。  14)连接电源,对于0.75mm厚的垂直板电泳,先在60V下电泳至溴酚蓝染料从积层胶进入分离胶,再将电压调至120V继续电泳至溴酚蓝到达凝胶底部为止。  15)关闭电源并撤去连接的导线,弃去电泳缓冲液。连同上槽一起将凝胶夹层取出。  16)将凝胶定位以便识别加样的顺序,将凝胶板从上槽解离出来,放在一叠吸水纸或纸巾上。  17)小心将封边的垫片抽出一半,并以此为杠杆橇起上面的玻璃平板,使凝胶暴露出来。  18)小心从下面的玻璃平板上移出凝胶,在凝胶的一角切去一小块以便在染色及干胶后仍能认出加样次序,接着就可进行蛋白质的检测。  19)转膜  将凝胶面与负极相连,硝酸纤维素膜与正极相连。(100V,1小时)要放于4℃。20)、清洗  将硝酸纤维素膜放入1X TBST中清洗3次,每次5分钟。摇床摇动。21)、封闭22)、一抗孵育  一抗用TBST1:1000稀释,将硝酸纤维素膜放入其中,37℃孵育1.5小时,(或4℃过夜)摇床摇动。23)、清洗  将硝酸纤维素膜放入1X TBST中清洗3次,每次5分钟。  24)、二抗孵育  二抗用TBST1:8000稀释,将硝酸纤维素膜放入其中,37℃孵育1小时,摇床摇动。  25)、清洗  同22,之后,用1X TBS在清洗2次,每次5分钟,以洗去膜上的Tween 20,因为它可以阻碍底物的沉积。  26)、显色  按如下配方配制显色液:  1mL水+1滴(大约50微升)试剂A(之后混匀)+1滴试剂B+1滴试剂C  将硝酸纤维素膜放入其中孵育,一旦显色,立即放入去离子水中终止反应。
(1)用已制备好的SDS-PAGE分离的蛋白凝胶。  (2)用一张滤纸,剪成与胶同样大小,在转移电泳缓冲液中预湿,放在Scotch-Brit Pad上,在胶的阴性端放上滤纸,胶的表面用该缓冲液浸湿,排出所有气泡。  (3)在胶的阳极面放置同样大小浸湿的硝酸纤维素膜,排出气泡,再在滤膜的阳极端放置一张滤纸,排出气泡,再放一个Scotch-Brit Pad。  (4)将以上“三明治”样装置放入一个塑料支撑物中间,将支撑物放入电转移装置中,加入电转移缓冲液。  (5)接通电源:使胶上的蛋白转移到硝酸纤维素膜上,电压为14V 4℃转移4小时或过夜。  (6)将滤膜放入丽春红S溶液中5分钟,蛋白染色水中脱色2分钟,照像,用印度墨水将分子量标准染色,在水中完全脱色。  (7)将滤膜放在塑料袋中,每3张加入5mL封闭缓冲液(1克速溶去脂奶粉溶于100ml PBS中),封闭特异性抗体结合位点,室温1h,摇动,倒出封闭缓冲液。  (8)在封闭缓冲液中稀释第一抗体,加入后室温放置1小时,将滤膜转到塑料盒中,用200mL PBS洗四次,摇动。  (9)在封闭缓冲液中稀释辣根过氧化物酶标记的二抗,重复步骤8。  (10)将滤膜放在100mL新配制的DAB底物溶液中,大约2~3分钟就可显色,用水冲洗终止反应、照像。  结果分析:分析阳性(显色)条带的分子量大小,而且根据信号(颜色)强弱分析蛋白表达量。
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